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MPTP被MAO-B催化转化为MPP<'+>的体外实验及2,3-吲哚醌的干预作用

MPTP被MAO-B催化转化为MPP<'+>的体外实验及2,3-吲哚醌的干预作用

作     者:陆丛笑 

作者单位:青岛大学 

作者专业:药理学

学位级别:硕士

导师姓名:岳旺

授予单位:青岛大学

授予年度:2003年

学科分类:1008[医学-中药学类] 

主      题:2,3-吲哚醌 甲基-苯基-四氢吡啶 单胺氧化酶-B 抑制剂 高效液相色谱法 帕金森氏病 

摘      要:2,3-吲哚醌(Isatin,ISA)不仅存在于海洋生物,也是人类脑内新发现的一种内源性MAO-B特异抑制因子,具有多种生物学活性。已证明ISA在C58BL/6J小鼠MPTP模型有保护脑神经作用,但ISA保护神经作用的分子机制仍未阐明,已知脑内MAO主要为B型,因此对ISA进行体外MAO-B抑制作用的研究,对进一步阐明其抗PD药理作用机制,开发研制新的抗PD药物具有重要意义。MPTP诱导产生的PD模型已成为研究PD机制与治疗的重要模型。由于MPTP在体内的生物转化需MAO-B催化完成,因此它也是研究MAO-B抑制剂的有力工具。 目的:研究ISA对MPTP生物转化的干预作用,以阐明其抗PD作用机制。 方法:以昆明种小鼠脑组织匀浆作为MAO-B来源,与不同浓度的MPTP恒温水浴(37℃)1h,乙腈沉淀蛋白提取反应产物MPP~+,用HPLC-UV分析MPP~+含量。采用日本岛津LC-6A色谱仪,SPD-6A检测器,SCL-6A色谱记录仪:色谱条件:色谱柱:Hypersil ODS_2 C_(18)5μm 200mm×4.6mm,保护柱20mm×4.6mm:流动相:乙腈:0.1MHAc=85:15(v/v),三乙胺调pH=5.6;检测波长:293nm;流速1.3ml/min;柱温:35℃。以化学合成药物MAO-B抑制剂司立吉兰(L-Deprenyl,DEP)为阳性对照药,研究ISA对MPTP生物转化的干预作用。 结果:实验表明,MPTP经脑匀浆作用生成MPP~+,且与MAO-B呈剂量相关性。在0.1~10μg·ml~1范围内,MPP~+浓度与峰面积A有良第一章中文摘要好的线性关系(r=0.9998)。精密度及回收率均较好,成功地应用于MPTP生物转化实验中MPP+浓度的测定。预先给予ISA,在较低浓度时ISA即表现较强的干预作用,且具有良好的量效关系,MPP+含量随ISA浓度的增加而减少。尽管DEP与ISA相比,其MAO一B抑制作用较强,但在本实验条件下,MPP+浓度对DEP及ISA浓度回归方程的回归系数的差别无统计学意义,说明MPP+浓度对两种药物的浓度曲线有相同的趋势,ISA�

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